混合淋巴细胞培养试验描述
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混合淋巴细胞培养试验(mixedlymphocyteculture，MLC)是一种测定受体和供体主要组织相容性抗原(HLA抗原)相容程度的试验方法，常用于器官移植前的组织配型.混合淋巴细胞培养将供者与受者的淋巴细胞做双向混合培养，或者灭活供者的淋巴细胞做向混合培养，细胞反应的程度与供-受者相容的程度呈负相关的试验。
免疫力降低,免疫性溶血,免疫力下降,免疫缺陷,免疫功能障碍,正常免疫球蛋白减少,血清免疫球蛋白可升高,免疫性肾炎,免疫损害
检查时：本试验可作为器官移植筛选供体的方法，转化率低者移植成功率高，转化率高者成功率低。 不适宜人群：排斥反应大的人。
正常： 形态计数法转化率<10%。 同位素计数法比较cpm得出P>0.05。 异常： 暂无相关资料
1.供体淋巴细胞的制备 新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中，轻稳加在液面上. 2000 r/min离心20 min，吸取中间雾状淋巴细胞层. 生理盐水洗涤2次. 台盼蓝染色，计数板计数. 调整细胞密度为2×109/L，分成3管，各自离心，留取沉淀. 每管中加入250 μL丝裂霉素(终浓度50 mg/L)和1.75 mL生理盐水，37℃水浴40 min， 生理盐水离心洗涤2次. 用含100 mL/L胎牛血清的RPMI 1640液调整细胞密度为1×1010/L.加入抗体封闭抗原.标记为D。 2.受体淋巴细胞的制备 新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中，轻稳加在液面上. 2000 r/min离心20 min，吸取中间雾状淋巴细胞层. 生理盐水洗涤2次. 用含120 mL/L胎牛血清的RPMI 1640培养液调整细胞密度为1×1010/L. 标记为R。 3.混合淋巴细胞培养 将已制备好的R和D按如下分组加入96孔板，置37℃，50 mL/L CO2孵箱中培养24 h. A组：R 50 μL+D 50 μL;B组：R 50 μL+D 50 μL+IL？2纯化中和mAb 15 μL;C组：R 50 μL+IL？2纯化中和mAb 15 μL;D组：R 50 μL. 每组3个复孔，空白对照组为RPMI 1640培养液100 μL。
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