血管紧张素转化酶描述
362人浏览血管紧张素转化酶
ACE可催化血管紧张素Ⅰ(十肽)水解成八肽的血管紧张素Ⅱ，使血管进一步收缩，血压升高。也可作用于肾上腺皮质，促进醛固酮的分泌。因此，ACE是肾素-血管紧张素-醛固酮的重要成分。ACE还催化具有降压作用的缓激肽水解而失去活性。ACE广泛分布于人体各组织，以附睾、睾丸及肺的含量较丰富，其中肺毛细血管内皮细胞ACE活性最高。
(1)三硝基苯磺酸钠(INBS)显色法： ①标本在室温或冰箱存放1周，酶活力无明显变化，-15℃保存3周酶活性稳定。 ②胆红素对ACE有明显抑制作用，故重度黄疸可使测定结果偏低。EDTA是ACE的强抑制剂，NaCl和Na2SO4对ACE有明显的活化作用，溶血、脂血对结果无影响。 ③本法与紫外分光光度法酶活力单位一致，但其测得值为紫外法的9倍。 (2)酶偶联法： ①当底物pH 8.0，GGCN 1.0mmol/L，GGT6.7ku/L时，ACE活性与吸光度值有良好线性。线性范围大，即使ACE在1500U/L，不用稀释也可获得理想结果。 ②GGCN浓度选择：本反应体系中GGCN既是测定酶ACE的受体，又是指示酶GGT的供体。以1.0mmol/L的GGCN最理想，在此浓度下GGCN与吸光度保持良好的线性。 ③GGT对测定的影响：本反应利用GGT将双甘肽与GGCN偶联，生成黄色的3-羧基-4-硝基苯胺，其加入量可直接影响测定结果。GGT高浓度可使底物过度消耗，使吸光度偏离曲线;低浓度GGT又使吸光度偏低，灵敏度不高。每次加入0.335 U GGT，可获得理想吸光度与线性。在此浓度下，酶基质液的空白管吸光度<0.1A。
正常： (1)三硝基苯磺酸钠(INBS)显色法26.1～56.7kU/L。 (2)酶偶联法289±83U/L。 异常： 暂无相关资料
(1)三硝基苯磺酸钠(INBS)显色法：取试管2支，标明空白管(B)和测定管(U)，各加血清0.01ml，B管加试剂(1)、(3)、(4)，U管加底物0.1ml，置37℃水浴30min;U管加试剂(3)、(4)各0.1ml，然后B、U管各加蒸馏水1.0ml，混匀;1500g离心10min，各取上清液0.75ml，分别加入试剂(2)1.0ml及TNBS 0.05ml，室温30min或37℃ 15min，用5mm比色杯，在420nm处，B管调零，读取U管吸光度。 (2)酶偶联法：取小试管4支，分别标明测定管(U)，标准管(S)，血清空白管(SB)，试剂空白管(RB)。 混匀，以双蒸馏水调零点，410nm波长比色，记录各管2min吸光度△A值。
京公网安备 11010102003638号