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现场直击宁波大榭口岸首次检出鼠携流行性出血热病毒

发布日期:2014-10-08 12:32:33 浏览次数:1595

“沙粒病毒阴性、淋巴脉络丛脑膜炎病毒阴性、钩端螺旋体阴性……”宁波大榭鼠传疾病实验室工作人员正在对前一天大榭港区媒介监测送检鼠类样本的检测项目和检测结果,进行逐项比对。

血热阳性”,工作人员瞪大眼睛反复看了几次,然后立即采用荧光定量PCR方法进行序列分析,确定了该批鼠类样品中有两只褐家鼠感染了流行性出血热病毒,这是近年来大榭口岸区域内首次检测到鼠类携带该传染病原体。

十月的早晨,已经能感受到明显凉意。小王带着两名媒介监测小组的成员,身着工作服,脚穿防蚤袜和胶鞋,戴上手套,去收前一晚布放的鼠笼和鼠夹。

医学媒介生物及其传播的各种疾病对人类危害非常严重,它们可随出入境交通工具、集装箱、货物等途径引起传染病的国际间传播流行,是世界最重要的公共卫生问题之一。

其中,鼠类是最常见的医学媒介生物,可携带的病原体达200余种,能传播鼠疫、流行性出血热等57种疾病。

作为国际卫生港口,大榭港区将鼠类疫情防控放在非常重要的位置。

大榭局有一支专业的媒介监测队伍,全部持证上岗,其中小王一人取得有害生物防治员中级资质,另4人取得初级资质。他们需要定期参加各类专业技能培训、生物安全防护培训,不定期进行抽查及能力考核,确保队伍的高素质及媒介防控的高效率。

为了确保监测点布点科学性、监测数据的准确性以及样本的全面性,大榭局建立了风险分析研判平台。并且,按照大榭港区的环境以及生态特征,划分了榭西码头堆场区、榭东油料储罐区、榭北工业区、关外村化工区4个监测区,共计64个监测点,涵盖了鼠类活动的各种环境。

除了通过媒介动态监测对鼠类进行“普查”,大榭局还在船舶卫生监督和检疫查验工作中不断完善并创新方式方法,将鼠类挡在国门之外。

“快来,这里逮到一只老鼠。”全副武装的小王迅速跑过来,眼前一只老鼠在鼠笼里瑟瑟发抖,他赶紧拿出白色布袋套好鼠笼,扎紧袋口,放进专用的运输箱,送往实验室进行检测。

鼠类检测要经过包括鼠种类的鉴定、寄生虫的分离、解剖,病毒的分离提取、检测和分析等一系列工作。团队合作在每份鼠样品检测中都得到充分展示,根据检测人员的专业特长不同,每一次检测均会安排2名至3名工作人员进行分工。

在P2+生物安全级别的媒介实验室里,实验室人员在做好自身生物安全防护以后,一步步严格操作。用乙醚麻醉处死后的鼠样品,测量体长、尾长、耳高、后足长、毛色等数据;用梳篦和牙刷对每个大鼠的腋下、鼠蹊部进行严密的筛查,检查是否有蜱、蚤、螨等寄生虫;在无菌条件下取出肺、肝、肾等组织样本;剪取鼠头,高温煮沸后分离头骨……

“鼠传疾病的检测是一个系统工程,我们的团队不仅需要专业的技术,还需要分工协作能力,更需要科学的方法,在保证工作质量的同时提高工作效率。”实验室高级工程师胡群说道。

随后,工作人员开始提取组织样品中存在的病毒核酸。身着生物安全防护服的工作人员坐在生物安全柜内进行细致的操作,小心地剪取一块块组织样本,加入缓冲液和氧化锆珠,将放入样本的适配器安装到组织研磨仪进行研磨。通过加样、洗脱,完成了病毒RNA的提取。

为了尽快筛查出鼠类样品中感染的各种病毒,实验室工作人员采用自行研发的简并RT-PCR检测试剂盒,进行扩增反应。

三个小时后,汉坦病毒属、沙粒病毒属、狂犬病毒属等各种病毒的粗筛结果就出来了,其中,汉坦病毒属出现特征条带。随后,再用能够对汉坦病毒属内汉滩病毒和汉城病毒分型的荧光定量PCR试剂,进行复核和分型,检测结果最终表明所检获的病毒属于汉城型的汉坦病毒,该病毒是引起流行性出血热的病原。

“两种方法检出的结果都是一致的,可以确认该鼠类样品感染了流行性出血热病毒。”对于技术检测,胡群向来严谨。

“随着国际贸易的发展、交通工具、货物、人员往来频繁,各种传染病通过医学媒介生物传入风险日益增大,身处口岸一线,我们必须采取有效措施,监测、评估国外传染病是否已经传入国内,为口岸传染病防控工作提供指导。”胡群说道。

实验室工作人员选择了汉坦病毒L、M、S三个基因片段的部分序列进行扩增,然后将扩增产物纯化后,送专业的生物公司进行测序。

在获得汉坦病毒的基因序列后,实验室技术人员将该基因序列与从国际上流行的20多种不同型别的汉坦病毒株相应基因序列进行比对,发现其与国内流行株ZT10的亲缘关系最为接近,未发现变异和输入传播。

实验室从2007年开始投入医学媒介携带传染病病原体的检测,曾检获全国首例输入性鼠疫阳性鼠类样品,得到过国家质检总局的通报表彰。

现在,实验室开展鼠类相关病原体检测项目达到20多项,其中鼠疫、汉坦病毒、汉城病毒、钩端螺旋体、森林脑炎等8个项目已经通过CNAS(中国合格评定国家认可委员会)认可。

该实验室于2013年被确认为宁波检验检疫局鼠传疾病实验室,承担宁波各口岸鼠类样品的种类鉴定和病原体检测任务。今年以来,实验室共检测大榭、梅山等口岸送检鼠类样品共69份,检测项目345项次,其中检出流行性出血热病毒阳性3例、新型沙粒病毒阳性12例、钩端螺旋体阳性1例,同时还检出多例样品携带木糖葡萄球菌、大肠杆菌、阴沟肠杆菌复合体、少动鞘氨醇单胞菌、浅黄假单胞菌等致病菌。《中国国门时报》

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