视网膜母细胞瘤RB1基因突变检测

项目介绍

视网膜母细胞瘤基因1(Retinoblastoma1, RB1)是人类第一个分离克隆的抑癌基因。RB1 基因是细胞周期的负调控因子, 通过与转录因子结合调节细胞增殖和分化所需基因的表达, 从而维持细胞生长发育的平衡。因此, 该基因的功能与细胞周期、细胞衰老、细胞凋亡、细胞分化和生长抑制等有关。视网膜母细胞瘤（Retinoblastoma, RB） 是婴幼儿常见的眼内恶性肿瘤，由视网膜母细胞瘤基因(RB1基因)两个拷贝的失活所致，分遗传型(40%)和非遗传型两种方式。遗传型视网膜母细胞瘤患者体细胞都携带有RB1基因生殖细胞性突变，85%-90%可能会发生双眼或单眼多灶型视网膜母细胞瘤，毕生对全身非眼部肿瘤易感。因而基于RB1基因生殖细胞突变检测（遗传分型、产前与症状前基因诊断），目前是视网膜母细胞瘤的预防与早期诊断的有效途径。RB1突变类型：RB1基因突变具有广泛的异质性，临床报道长约18.3kb的基因中27个外显子多数发现有突变。突变种类也多样化，以突变导致RB1基因功能改变为标准，可以将突变分为无义突变、移码突变、错义突变、整框突变、启动子突变及内含子突变（影响拼接位点）。

样本要求

蜡块，石蜡切片，石蜡碎片（石蜡卷），新鲜组织四者任选一项，石蜡包埋时间为半年内，且组织切片中肿瘤细胞占比应大于50%。蜡块标本中包含的组织量不少于10 mm3，即组织总体积不少于米粒大小。标本要求切片厚度为5-10 μm（不能小于5 μm），每片面积在250 mm2，数量不少于8片（若每片面积不能达到要求，则增加送检切片数量，使总组织量在20 mm2以上）。新鲜组织要求：取出后立即浸泡在95%酒精中，组织量不少于20 mm3，即组织总体积不少于米粒大小。EDTA抗凝血5-10ml，冷藏（2-8℃

参考值

突变/未突变（测序法）

临床意义

到目前为止所报道的突变分析，是对少数单侧或双侧视网膜母细胞瘤病人的肿瘤样本进行分析的，结果表明最高突变率为80 % ，但要描述生殖细胞RB1突变谱，需要对大量病人的结构性DNA进行研究，这样的研究所发现的突变率较低( 30 % )，并不是RB1基因所特有的。因此对于患者视网膜母细胞瘤的患儿应该进行RB1全外显子测序，以了解它的遗传结构和突变谱，精确预测独立的视网膜母细胞瘤病人的发病是必要的。对引发视网膜母细胞瘤的RB1基因突变的诊断，不仅对于患病个体的临床治疗有重要作用，而且对于个体的兄弟姐妹以及后代患病状况的监测也有重要意义。双侧性视网膜母细胞瘤患者与13%-15%的单侧性患者可以在血检中检查出RB1基因发生了突变。如果患病个体被检测出基因突变，则其相关亲戚也需要进行检测；如果没有检测出基因突变，那么患儿的亲属就没有必要再进行麻醉检查等。85%的单侧性患儿在血检中检测不出RB1基因突变，对于这种情况，分子水平的检查以及临床上对其兄弟姊妹的检查也都没有必要。如果患儿检测出RB1基因突变，那么可以用羊水细胞为这种高危妊娠做家族性突变检查，对于确认携带了突变的胎儿，则可以较早地进行分娩，并对其进行更为及时的治疗。对于采用了高敏感度（93%的检测敏感度）检测后依旧检测不出RB1基因突变的情况，RB1基因发生突变的机率会降至1%。加拿大的国家性指导规则指出这种情况下只建议采取非麻醉形式的临床检查对患病个体及其未来的后代进行突变检查。

结果处理

无

注意事项

无