如何诊断出真菌过敏性哮喘
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真菌是引起过敏性哮喘的原因之一,对于真菌引起的过敏性哮喘该如何诊断呢?以下是真菌过敏性哮喘的诊断标准:
1.病史采集 真菌变应性哮喘患者的病史采集非常重要,不但有助于哮喘的诊断,而且也有助于寻找致敏真菌。因此,除一般病史采集中的项目外,特别应询问患者的发病与职业、生活和工作环境的关系,可疑的诱发因素,前驱症状,病程经过和既往发病及诊治情况等。个人和家族过敏史也是有价值的参考资料。
2.临床检查 典型的支气管哮喘表现为广泛的支气管病变。发作时,患者呈呼气性呼吸困难,肺部可闻及呼气性哮鸣音。病程较长者可形成桶状胸,婴幼儿可有鸡胸畸形。早期患者在缓解期可无任何体征。
(1)皮肤试验:这是在真菌变应性哮喘的特异性诊断中应用最广的常规检测方法。一般用1∶100 真菌抗原浸液,采用1ml 注射器,配用4 号注射针头,在病人上臂外侧皮内轻轻注入0.01~0.02ml,15~20min 观察皮肤反应。真菌变应原皮肤试验除出现速发相反应,还经常出现迟发相反应,应予注意。
(2)支气管激发试验:结果准确可靠,由于采用真菌变应原制剂作吸入激发试验时可诱发症状,应在严密观察下进行。因经常出现迟发相反应,在试验后的6~24h 内可再度出现哮喘反应,应予注意。
(1)放射变应原吸附试验(RAST):将真菌变应原吸附在固相支持物上,加入病人血清。如病人血清内含有对该真菌的特异性IgE 抗体,则两相结合不能洗脱。当再加入用同位素标记的马抗人IgE 血清时,则三者结合成一带有放射性的复合物,可以在γ计数器上测出具体的放射量。放射量与病人特异性IgE 的量成正比。可据以判断病人是否对真菌变态反应及其过敏的程度。
(2)酶联变应原吸附试验(ELISA):其原理为先用真菌变应原吸附在聚苯乙烯塑料板孔上,然后加入待测病人血清,再加入羊抗人酶标IgE 抗体,再加入该酶的底物,中止反应。利用其显色反应,在酶标比色仪上测定OD 值,以判断病人对真菌的敏感性及敏感程度。
(3)嗜碱粒细胞脱颗粒试验:取病人静脉血,经抗凝处理后,离心层析提取嗜碱粒细胞。将病人嗜碱粒细胞移入两个试管,分别加入真菌变应原及空白变应原溶媒。在37℃孵育30min 后,用阿利新兰(Alcian blue)染色,在血细胞计数器下分别计数嗜碱粒细胞数。如果与真菌变应原共孵的样本所计嗜碱粒细胞,少于与空白变应原溶媒共孵的样本30%以上,说明由于特异性抗原抗体反应,导致30%以上的嗜碱粒细胞脱颗粒不能在显微镜下检出,即属阳性反应。脱颗粒的百分比越高,显示过敏程度越重。
(4)组胺释放试验:此试验的原理在于将病人的血细胞,经与真菌变应原作用后,检测其组胺释放的量。病人对真菌的敏感性越高,组胺释放的量越高。由此测定病人对真菌的致敏程度。
(5)真菌抗原抗体的琼脂扩散试验:此试验可对真菌过敏性肺炎、肺泡炎或过敏性支气管肺曲菌病患者进行特异性诊断。一般采用琼脂双扩散法,将病人血清与不同浓度的真菌变应原进行扩散试验,以观察沉淀线的出现。此法在国内对烟曲霉及青霉等抗原均已获得阳性结果。对明确病人致病菌种是较好的客观依据。
(6)病人痰液或支气管分泌物的真菌直接涂片检查:从病人由深部咳出的新鲜痰液中挑取少许黏稠呈灰褐色的部分,在玻片上薄薄摊开,不等干燥,即以0.05%乳酸棉蓝1 滴,5min 后在显微镜下检查浅蓝染色的真菌孢子或菌丝体。若多次检查阳性,可作为诊断真菌变态反应的参考性依据。
对于真菌变态反应的诊断,除上述各种体内外试验外,对于病人生活环境及工作环境的实地调查,亦有重要意义。调查中应着重注意患者居住或工作场所的温度湿度,采光情况,卫生状况,室内外及附近有无明显的真菌滋生源,并应在现场进行真菌曝片采样及曝皿培养,以实地估测环境中真菌的含量与种类。
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